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非洲猪瘟实验室将会越来越重要。

检疫实验室也被称为动物疫病实验室，目前国家最重视的检疫类实验室就是非洲猪瘟实验室。2019年7月份，农业农村部下达通知，要严格开展非洲猪瘟实验室检测，减少动物疫病的风险。

非洲猪瘟实验室主要针对跨省调运种猪在产地检疫实验室进行检测，对生猪进行对口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病、猪圆环病毒病、布鲁氏菌病等5种动物疫病的检验检测及风险评估。

猪瘟有多可怕？

科普时间

众所周知，非洲猪瘟是一种非常可怕的疾病，会导致猪大批量的死亡。其特征是发病过程短，最急性和急性感染死亡率高达100%，临床表现为发热，心跳加快，呼吸困难，部分咳嗽，眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物，皮肤发绀，淋巴结、肾、胃肠粘膜明显出血，非洲猪瘟临床症状与猪瘟症状相似，只能依靠实验室监测确诊。

不过不用担心的是非洲猪瘟，只传染猪不传染人。非洲猪瘟不是“人畜共患病”，不传染人，但对猪来说是非常致命的。非洲猪瘟疫情需要农业部门和养殖者的重视。

2007年以来，非洲猪瘟在全球多个国家发生、扩散、流行，特别是俄罗斯及其周边地区。2017年3月，俄罗斯远东地区伊尔库茨克州发生非洲猪瘟疫情，疫情发生地距离我国较近，仅为1000km左右；

我国是养猪及猪肉消费大国，生猪出栏量、存栏量以及猪肉消费量均位于全球首位，每年种猪及猪肉制品进口总量巨大，与多个国家贸易频繁；而且，我国与其它国家的旅客往来频繁，旅客携带的商品数量多、种类杂。因此，非洲猪瘟传入我国的风险日益加大，一旦传入，其带来的直接以及间接损失将不可估量。

对此，2017 年 4 月 12 日，我国农业部发布了关于进一步加强非洲猪瘟风险防范工作的紧急通知。2019年7月份，农业农村部下达通知要严格开展非洲猪瘟实验室检测，减少动物疫病的风险。

农村农业部最新通知

农业农村部表示，为贯彻落实《国务院办公厅关于加强非洲猪瘟防控工作的意见》(国办发〔2019〕31号)要求，建立产地检疫风险评估机制，促进种猪规范有序调运，稳定生猪生产发展，农业农村部就非洲猪瘟疫情应急响应期间，调整和加强跨省调运种猪产地检疫有关事项发布通知，要求调整跨省调运种猪产地检疫实验室检测项目，严格开展动物疫病风险评估。

通知要求，根据当前生猪生产形势需要和动物防疫管理工作实际，对跨省调运种猪产地检疫实验室检测项目进行调整，继续严格开展非洲猪瘟实验室检测，检测数量(比例)100%；对口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病、猪圆环病毒病、布鲁氏菌病等5种动物疫病，在种猪场日常监测的基础上开展风险评估，不再进行实验室检测。在非洲猪瘟实验室检测方面，采集的血液样品可按照一定的生猪数量进行混样，具体混样数量可根据有关技术指标科学确定；样品送检前至种猪调出前对拟调运种猪采取隔离观察措施的，检测时限可以延长至调运前7天。

在严格开展动物疫病风险评估方面，通知提出，在暂停口蹄疫等5种动物疫病实验室检测期间，各地要加强对种猪场的动物疫病风险评估，风险评估达到要求的，方可对其跨省调运种猪出具动物检疫证明。请各省级畜牧兽医主管部门制定本省份的种猪场动物疫病风险评估方案，评估病种应当包括口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病、猪圆环病毒病、布鲁氏菌病等动物疫病，评估内容应当包括区域动物疫病流行病学调查情况、种猪场防疫条件、养殖档案记录、有关疫病日常检测情况等。由输出地县级动物卫生监督机构按照种猪场动物疫病风险评估方案，对种猪场开展风险评估。评估结果有效期不超过3个月。

农业农村部指出，跨省调运种猪到达输入地后，当地动物卫生监督机构要监督种猪货主落实动物防疫主体责任，严格执行隔离观察有关措施，指导种猪货主签订承诺书、建立隔离观察台账记录，确保种猪安全和可追溯。

非洲猪瘟实验室如何建设？

设计方案

国家越来越重视非洲猪瘟对农业与养殖业的影响，所以越来越多人开始建设检疫实验室，进行动物疫病的检测项目。那么，非洲猪瘟实验室应该如何建设呢？

非洲猪瘟实验室原则上分为四个单独的工作区域：试剂准备区、标本制备区、扩增区、产物分析区。为避免交叉污染，进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行，从试剂准备区→标本制备区→扩增区→产物分析区单向流动。

实验室空调通风系统设计及压力控制是非洲猪瘟实验室的重中之重，虽然非洲猪瘟实验室没有严格的空气洁净度要求，但是为避免各个功能区之间交叉污染的可能性，应采用独立送风、全送全排的气流组织形式，并保证各功能区的压力梯度要求。

试剂准备区

主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区，不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。

标本制备区

主要进行的操作为样本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外，由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染，所以应避免在本区内不必要的走动。

扩增区

已制备的DNA模板 (来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。

产物分析区

主要进行的操作为扩增片段的测定。本区是最主要的扩增产物污染来源，因此对本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。

非洲猪瘟实验室的核心问题是如何避免污染，由于一旦发生污染，实验就必须停止，直到找到污染源为止，而且实验结果必须作废，需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐，浪费人力物力。非洲猪瘟实验室常见有扩增产物的污染；天然基因组DNA的污染；试剂的污染以及标本间的污染等。因此要避免污染，事前预防是关键。

专业的设计是避免污染的源头，首先应做到各个功能区域科学合理布置；各个功能区域要有明显的标记(如醒目的门牌或不同的地面颜色等)，以避免各个不同实验区域设备物品、试剂等发生混淆。

其次应具备合理的空调通风系统设置，尽量采用独立送风、全送全排的空调系统；严格的压力梯度控制、缓冲、门开启关闭互锁，以确保“不串风”。

用于非洲猪瘟病毒检测的实验室，推荐配置以下设备：II级生物安全柜、混匀仪（涡旋振荡器）、高速离心机、金属浴或恒温水浴锅、组织破碎仪（均质器/匀浆仪）、移液器、冷藏冷冻冰箱、高压灭菌锅。同时，建议实验室配备合适的个人防护用品，如防护服、手套、口罩等。

系统的培训、规范的管理是非洲猪瘟成功运行的重点，可围绕以下内容建立健全培训与管理制度：

1、扩增检验实验室的技术人员必须进行上岗培训，经培训合格后才能从事临床基因扩增检验的工作；

2、操作中使用一次性帽子也是一个有效地防止污染的措施；

3、在实验操作过程中，操作者必须戴手套，并经常更换；

4、清洁工作及时、正确；除常规的消毒液体对表面进行擦拭消毒或紫外线灯的照射消毒外，对一些实验设备还应进行高压消毒处理；

5、严格控制进出实验室的人员；实验工作结束后，必须立即对本区进行清洁；与实验无关的人员不得随意进出实验室，有条件的情况下要设置独立的通道和进出整个实验区的门；尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性。

6、扩增产物分析区是最主要的扩增产物污染来源，废液不能在实验室中倾倒，必须经消毒液浸泡消毒后在远离实验室的地方弃掉，用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理，如焚烧等；

7、扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质，应特别注意实验人员的安全防护；

8、完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件，应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器，如生物安全柜、离心机、紫外灭菌灯、超净工作台、加样器等；

AT THE END

结尾总结

非洲猪瘟实验室会越来越重要

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒（ASFV）引起猪的一种急性、热性、高度接触性动物传染病，临床上以高热、网状内皮系统出血和高死亡率为特征，易感猪群的病死率高达100%。世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。目前，针对非洲猪瘟防控，尚无有效的商品化疫苗，防控重点是做好生物安全管理和早期诊断扑杀净化。所以非洲猪瘟实验室的建设会越来越重要。

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